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环亚集团在ARENA系统中测定左旋咪唑毒性的方法

发布时间:2025-01-19   信息来源:邱震露

左旋咪唑是一种合成驱虫药物,广泛运用于兽医学,主要用于治疗由线虫引起的寄生虫感染。作为一种有效的驱虫药物,它的作用机制是靶向线虫的乙酰胆碱离子通道受体(Martina et al.)。除了在医学领域的应用,左旋咪唑在多个研究领域,尤其是在秀丽隐杆线虫的麻痹实验中也得到了广泛应用。该药物能够有效地诱导线虫瘫痪,这一特性对神经元功能及肌肉生理学的研究具有不可替代的价值。为了更深入地探讨毒理学实验,下面将提供一个利用左旋咪唑的实验示例。研究人员可以基于此示例框架,使用不同的可溶性药物进行他们的毒性研究。

环亚集团在ARENA系统中测定左旋咪唑毒性的方法

实验材料包括:带盖的6孔板、NGM培养基、M9缓冲液、左旋咪唑原液(浓度为100mM,水溶性)、同步成虫种群,以及WMicroTrackerArena设备。

实验步骤如下:

  1. 在NGM培养皿中培养同步成虫种群(OP50)。
  2. 用M9缓冲液将蠕虫从培养皿中取出,转移到15毫升无菌试管中。
  3. 让虫子静置,倒出上清液,注意避免扰动沉淀颗粒。
  4. 使用5ml M9缓冲液进行清洗,轻轻摇动或翻转试管。
  5. 重复上述步骤,倒出上清后加入3ml M9缓冲液。
  6. 取样三次,每10μl计算虫数,并计算其平均值。
  7. 制备悬浮液,浓度为[35虫/10μl]。
  8. 将10μl虫液转移至6孔板中。
  9. 使用WMicroTrackerARENA观察蠕虫的活动情况。

实验备注:至少进行三次技术重复,以及至少两次生物重复。实验结果显示,左旋咪唑对N2线虫运动活性具有剂量依赖性的抑制反应,试验测定不同浓度的左旋咪唑(0µM(对照)、100µM和200µM)的治疗效果。在6孔板中,每孔选择35只年轻的N2成虫。在23℃下记录4小时的运动数据。数据代表四个独立实验的平均值,包括重复实验结果。

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