第一章：实时荧光定量PCR概述

一、实时荧光定量PCR的概念

实时荧光定量PCR（Real-time PCR）是一种创新的分子生物学技术，通过荧光信号的实时积累，监测整个PCR反应过程。最终，我们可以通过CT值和标准曲线对未知模板进行定量分析。

二、实时荧光定量PCR的原理

A. 化学原理：该方法利用荧光信号将PCR产物DNA分子转化为可检测的信号，荧光值的测定能够反映产物DNA的量。

B. 数学原理：通过循环数“n”（CT值），计算出起始DNA的数量，从而实现精准的定量。

三、实时荧光定量PCR方法的选择

在选择实时荧光定量PCR方法时，需要考虑实验的具体要求、样品类型以及预期的灵敏度和特异性。

四、实时荧光定量PCR的优势

实时荧光定量PCR在比较不同样本中某基因表达量时，具有如下优点：

• (1) 能够实时监测PCR反应的进程，提供更准确的数据。
• (2) 具有更大的检测范围，能够精准定量样本中的起始量。
• (3) 在单管中实现扩增与检测，无需进行额外的PCR后处理，提高了实验便利性。

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