环亚集团通用细胞冻存试剂盒使用说明书 (BA3309)

一、产品简介

本产品专为各种哺乳动物原代细胞和传代细胞系的冻存保种而设计，复苏后能够有效保持细胞的存活率，且储存稳定，使用方便。

产品组成：通用细胞冻存液 BA3309，规格为 100mL。

保存条件：需在-20℃避光保存，有效期两年。

注意事项

1. 使用离心机时，请务必选择水平离心机，并设定合适的参数，以避免因操作不当而影响实验结果。
2. 本产品为无菌产品，实验过程中请穿戴实验服和一次性手套，确保无菌操作以防止微生物污染。
3. 使用前务必确认试剂完全融化并充分混匀。
4. 在冻存前，应确保细胞状态良好。

自备材料

细胞冻存材料

1. 仪器：水平离心机、细胞计数仪、-80℃冰箱。
2. 耗材：细胞冻存管、程序性冻存盒、低吸附枪头。

二、细胞复苏材料

细胞复苏所需材料

1. 仪器：水平离心机、水浴锅。
2. 试剂：RPMI 1640培养基。
3. 耗材：酒精棉球、低吸附枪头、离心管。

使用方法

细胞冻存

1. 使用前将通用细胞冻存液完全融化并混匀。
2. 用细胞计数仪计算细胞总数，冻存密度通常为 1x10^6/mL。
3. 对细胞进行离心，弃去上清液，保留细胞沉淀。注意，不同类型的细胞离心条件可能不同，例如，人PBMC的离心条件为 300×g，5分钟。
4. 根据细胞数量计算所需的冻存液体积，用移液器吸取冻存液并小心重悬细胞。
5. 将细胞均匀分装至冻存管中并进行标记。注意：须使用专门用于液氮冻存的细胞冻存管，切勿使用普通离心管。
6. 将细胞冻存管放置于可逐步降低温度的装置中，如程序性冻存盒，随后放入-80℃冰箱，确保温度的下降速率为约1℃/min。24小时后可将其转移至液氮中以延长保存时间。

细胞复苏

1. 开启37℃恒温水浴锅，取一个离心管，加入5mL细胞培养基，放入水浴锅中加热至37℃，约需2-5分钟。
2. 取出冻存管，立即放入水浴锅中快速摇晃，使冻存液快速融化。
3. 融化后，用酒精棉球擦洗冻存管外部，以降低污染风险。
4. 迅速打开冻存管，将冻存液一滴一滴加入已经调好的培养基中，同时轻轻摇晃，完成后放入水平离心机，以4℃、300×g离心5分钟。
5. 弃去上清，加入适当体积的培养基重悬细胞。

环亚集团致力于免疫学、细胞生物学及分子生物学等领域核心试剂产品的研发、生产与销售。作为中关村高新技术企业，成立于2017年，为全国超过10,000个客户提供超过20,000种优质产品。我们将通过高品质树立品牌，以卓越的服务赢得客户口碑，专注于生物原料及生物化学试剂的开发与成果转化，努力成为行业内的重要供应商。